One-Step Kit de Detecção de vírus da hepatite B

[Nome do Produto]
Kit de Detecção de um só passo para vírus da hepatite B (QPCR-Probe)
[Especificação Embalagem]24rxns/

[destinados a utilização do kit]
Este kit é utilizado para a detecção qualitativa do vírus da hepatite B (HBV) em sangue e as amostras de soro. Dispõe de meios auxiliares para o diagnóstico dos pacientes infectados HBV sem extração e purificação de ácido nucleico. Os resultados dos testes devem ser combinadas com diagnóstico clínico.

[O princípio de detecção]
Este kit adopta o método de PCR combinada com sonda de fluorescência na tecnologia de amplificação in vitro. Neste método , a sonda de HBV contém um repórter corante fluorescente FAM em 5'extremidade da sonda e um corante quencher BHQ em 3'extremidade da sonda. Quando a sonda está intacta, a proximidade do Reporter corante no corante quencher suprime a fluorescência do Activity Reporter. A clivagem da sonda durante a reação de PCR espacialmente separa o corante repórter do corante quencher,
permitindo a detecção de fluorescência de corante do Activity Reporter. Os fragmentos de corante do Activity Reporter são deslocados do alvo, resultando em aumento da fluorescência. Esta etapa, que permite o acúmulo de sinal de fluorescência e produtos de PCR formado síncrona, assim atingir a detecção qualitativa do HBV na endocardite paciente em amostras de soro, que fornecem auxiliarymeans para a infecção por VHB no tratamento do paciente. [O Conteúdo do Kit]

Ref.	Tipo de reagente	Apresentação (24 rxns)	Quantidade
1	O VHB-PCR Rection misturar	1 vial,1500μL	1
2	O VHB controle positivo	1 vial,60 μL	1
3	Tampão de diluição da amostra	1 vial,1000μL	1
4	O VHB controle negativo	1vial,200μL	1
5	Manual do utilizador	1	1

O VHB-PCR Rection misturar: premiers específicos e sonda fluorescente do HBV, qRT-Master Mix para PCR.
O VHB: Pseudovirus controle positivo com o VHB gene NP estabelecidas in vitro, plasmídeo recombinante interno de
tampão de diluição da amostra: tampão PBS
Nota: lotes diferentes no kit componentes não devem ser trocados.
Sensibilidade da análise: 20 cópias/rxn.

[Procedimento]
1. Preparação da amostra e de tratamento da
amostra de sangue total (citrato de sódio a anticoagulação) ou amostra de soro
2. Preparação do reagente de amplificação de
retirar o HBV-PCR Rection Mix, o controle positivo e
controle negativo, centrifugar a amostra após a descongelação. Adicionar 48 μl do HBV-Mix de PCR
em cada tubo de reacção.
3. A adição de amostras e controles para os tubos de reacção
? Adicione as amostras colhidas separadamente o passo 1, o controle positivo e controle negativo para tubos diferentes:
1) Separadamente adicionar a 2 μL de amostra de soro ou 0,5 μL toda a amostra de sangue da etapa1 tubo de reacção ao VHB.
2) Separadamente 2 μL de controlo positivo para outro HBV tubos de reacção de controlo positivo.
3) Separadamente 2 μL controle negativo para outro tubo de reacção de HBV como controle negativo.
Fechar o tubo, homogeneizar e girar para baixo a mistura. Operação deve ser realizada sobre o banho gelado. 2000rmp giram para 10s. Colocar o tubo de reacção sobre o instrumento de teste.
Nota: para evitar a diferença a partir da amostra de soro, é recomendável usar a amostra de soro que é claro. Para a amostra nublado, se o primeiro resultado do teste é negativo, por favor, diluir a amostra para 4-10 dobra usando o tampão de diluição fornecidos no kit para detectar novamente.
4. A amplificação da PCR

Pro.	Dez.	Tempo	N° ciclo
1	95ºC	1 Segundo	Ciclos de 15
	50ºC	1 Segundo
3	95ºC	1min	Ciclo de 1
4	95ºC	5 Segundo	35 ciclos
	55ºC	10 segunda (adquirir) de fluorescência

Execute o seguinte protocolo no instrumento:
selecção de canais de fluorescência:
530nm channel (ReporterFAM): HBV
consulte o manual de instrumentos para a detecção do conjunto de canais específicos.
[Quality Control]
Se o valor de TC da amostra de controlo positivo≤ 25, e o ct do controlo negativo é 0 ou>28, este teste é válido,ou o teste é inválido.
[Interpretação dos resultados]
um.Se o ct da amostra ≤28, relatório positivo para o HBV;
b.Se o ct da amostra 30>CT>28, teste novamente. Se a detecção de duplicados de amostras de CT>28, valor de TC de controle negativo é none, relataram positivo para o HBV. Se a Detecção de Duplicados Ct da amostra é 0 ou nenhum, relataram negativo para o HBV; c. Se o ct da amostra é nenhum valor ou>28, relatório negativo para o HBV.