Introdução:
Ditiotreitol é um agente redutor comumente utilizado, também conhecido como dimercaptothreitol (DTT), que tem forte capacidade de redução. A sua capacidade de redução deve-se em grande parte à estabilidade conformacional do seu anel de seis membros oxidado (contendo ligações de dissulfeto). A redução de potência é afectada pelo pH e só pode desempenhar um papel de redução quando o pH é superior a 7. Isto porque apenas o ião negativo do sal de tiol (-s-) sem o protão está activo, enquanto o tiol (-SH) não está. Entretanto, os grupos de sulfhidyl têm geralmente um pKa de ~ 8.3.
Propriedades químicas:
A redução de um sulfeto típico por ditiotreitol é composta por duas reações sucessivas de troca de sulfidrílo-dissulfeto. O estado intermediário formado pela primeira reação é muito instável, pois o segundo grupo de sulfhidrillo no DTT tende a se conectar com o átomo de enxofre oxidado, de modo que o estado intermediário seja rapidamente convertido à estrutura de oxidação cíclica do DTT para completar a redução de ligações de dissulfeto. O ditiotreitol (DTT) tem fraca estabilidade, porque é facilmente oxidado pelo ar. Mas pode ser mantido congelado ou Tratado em gás inerte para prolongar a sua vida útil. Devido à baixa nucleoficidade do enxofre protonado, a redução efetiva do DTT diminui com a diminuição do pH. O fosfina-HCl Tris (2-carboxietil) (cloridrato de TCEP) pode ser utilizado como substituto para o DTT a pH baixo e é mais estável do que o DTT.
Função de:
O ditiotreitol tem efeito antioxidante, que pode proteger o grupo redutor na molécula enzimática, manter o ambiente redutor e estabilizar a atividade da enzima. O DTT também contém certos inibidores da ribonuclease, que podem inibir a atividade da ribonuclease. "Tem efeitos semelhantes aos do mercaptoetanol (dimercaptoetanol), mas o DTT tem um odor muito menos irritante e muito menos toxicidade do que o mercaptoetanol." Quando a concentração de DTT foi 7 vezes menor que a do mercaptoetanol, os dois efeitos foram semelhantes. Mas o DTT é ligeiramente mais caro. É usado como protetor de tiol de proteína e para clivagem e análise sequencial de ligações de dissulfeto de proteína.
Aplicação:
O ditiotreitol (DTT) é um agente redutor orgânico de pequenas moléculas com a fórmula química C4H10O2S2, que é utilizada principalmente no campo da biotecnologia como reagente de clivagem proteica. Atualmente, o método mais utilizado para a síntese de ditiotreitol é oxidar o triitol com permangato de potássio e, em seguida, obter tiotreintermediário sob a ação do ácido tioacético e, finalmente, hidrolisar o tiointermediário para obter ditiotreitol.
Finalidade
Utilizado? Um excelente reagente para manter a base de has no estado reduzido; redução quantitativa do dissulfureto; o DTT foi eficaz na redução de ligações de dissulfeto de proteínas no tampão de amostra antes da SDS-PAGE. O DTT pode também ser utilizado para reduzir a ponte de dissulfureto do agente reticente N,N'bis(acriloyl)cistamina para quebrar a matriz de gel de poliacrilamida; na análise de sequência de proteínas, é utilizado para limpar ligações de dissulfureto; para investigar reacções de redução crescentes e dinâmicas; Previne a reação oxidativa que ocorre durante a extração de colecistocinina do cérebro e do tecido duodenal
| Ponto de fusão: |
41-44 ° C (aceso.) |
| Ponto de ebulição: |
125 ° C |
| Rotação ótica específica: |
- 0.2 ~ 0.2 ° 20ºC (C 5, H2O) |
| Densidade da densidade: |
1.04 g/ml a 20 ° C |
| Densidade do vapor: |
5.3 (vs. ar) |
| Pressão de vapor: |
0.019 - 0,29 Pa a 20 - 50ºC |
| Índice de refracção: |
1.5200 (estimativa) |
| Ponto de inflamação: |
> 230 ° F |
| Condições de armazenamento: |
- 20 ° C (ou 4 ° C a curto prazo). |
| Grau de solubilidade: |
H2O: 50 mg/mL, incolor e límpido |
| formulário: |
Cristalização do pó branco |
| Coeficiente de acidez (pKa): |
PK1:8.9 (25 ° C) |
| VALOR DE PH: |
4.0-6.0 (20-25ºC, 0,1m em H2O) |
| Odor: |
Um mau cheiro |
| Descoloração do indicador de ácido-base gama de ph: |
4-6 a 15,4 g/l a 25 ° C |
| Solubilidade da água: |
solúvel livremente |
| Sensibilidade: |
Sensível ao ar |
| Comprimento de onda máximo (λmax): |
λ: 260 nm Amax: 0.400λ: 280 nm Amax: 0.100 |
| estabilidade: |
Estável, mas sensível ao calor. Incompatível com oxidantes fortes. A temperatura de congelação foi mantida entre -20 e -10 ° C. |
| Registo: |
0.07 a 25ºC e pH5 |
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