descrição do Produto
Nome do produto MagPure Blood RNA Kit
Especificações do produto 48 Plips/Kit
Introdução
Este produto fornece uma extração simples e rápida de ARN total de sangue, camada de búfala, medula óssea, suspensão de células e outros fluidos corporais. O kit baseia-se na tecnologia de purificação de partículas superparamagnéticas, na extracção de fenol-clorofórmio ou na precipitação de álcool. Todo o processo de extração é de apenas 60 minutos. O ARN purificado está pronto para aplicações a jusante, tais como RT-PCR, teste de ARN de vírus , etc. Os tampões dos kits de ARN MagPure podem ser utilizados tanto para máquinas de extracção manual como para máquinas automáticas de extracção de ácidos nucleicos. Estes kits são adequados para a extracção de ARN a partir de uma suspensão de células ≤ 5x106, 200~300 µl sangue total, 200µl camada de búfala, 100µl medula óssea.
Composição principal
| Ref.a |
R661101 |
| Tempos de purificação |
48 Preves |
| Partículas de ARN MagPure |
1.7 ml |
| Proteinase K |
24 mg |
| Tampão de dissolução da protease |
1.8 ml |
| DNase I |
600 µl |
| Tampão DNase |
30 ml |
| Tampão MLB |
40 ml |
| MCB da memória intermédia |
9 ml |
| Buffer MW1 |
22 ml |
| Buffer MW2 |
20 ml |
| Água isenta de RNase |
10 ml |
Condições de armazenamento e validade
Este produto pode ser armazenado à temperatura ambiente (15 ~ 25oC) durante 12 meses. As partículas de ARN MagPure, Proteinase K, DNase I são enviadas à temperatura ambiente. Após a recepção, conservar DNase I a -20ºC e armazenar partículas de ARN MagPure e proteinase K a 2 ~ 8ºC.
Materiais e equipamento a fornecer pelo utilizador
1.100% de etanol
2. Diluir os tampões MW1 e MW2 com etanol a 100 % e conservar à temperatura ambiente
3. Diluir o tampão MCB com o armazenamento à temperatura ambiente
4. Dissolver a Proteinase K com o tampão de dissolução da protease no Proteinase K e conservar a -20 ~ 8ºC
Kingfisher ou isolamento de extractor semelhante:
1. Adicionar os reagentes/amostra ao poço da placa de poços fundos de acordo com a tabela abaixo.
| Nome da placa |
Reagentes pré-carregados |
Adição antes da utilização |
| Placa de amostra |
- Partículas de Pipet 20µl Proteinase K e 30µl MagPure RNA
- Pipetar 150 ~ 300µl da amostra para o poço da placa:
- 200~300 µl sangue total, plasma, soro, fluidos corporais
- 200µl camada de búfala ou 150µl medula óssea
- Até 5 linfócitos x 106 ou células de cultura em PBS 200µl.
- Adicionar 600µl MLD. Buffer
|
| Lave a placa 1 |
600µl tampão MW1, colocado em 96 Ponta magnética |
| DNase |
290µl DNase Buffer e 10µl DNase I |
| Lave a placa 2 |
600µl Buffer MW2 |
| Lave a placa 3 |
600µl Buffer MW2 |
| Placa de eluição |
60µl água isenta de RNase |
2. Coloque um pente de 96 pontas para ímãs de poços profundos na placa de lavagem 1.
3. Inicie o protocolo R6611_Flex com o Kingfisher Flex 96 e carregue as placas.
4. Adicione 450µl MCB de tampão à placa DNase durante a etapa de fornecimento.
5. Coloque a placa DNase de volta no instrumento e pressione Iniciar. Após a pausa, o protocolo continuará até ao fim
6. Após a conclusão do ensaio, retirar as placas e armazenar o ARN total purificado.
Guia de resolução de problemas
A: Rendimentos de ARN baixos
1. Ressuspensão incompleta das partículas MagPure: Voltar a suspender as partículas MagPure por centrifugação antes da utilização.
2. Perda de partículas MagPure durante o procedimento: Tenha cuidado para não remover as partículas MagPure durante o procedimento.
3. Partículas MagPure não ressuspendidas durante a ligação: Centrifugar vigorosamente durante 2 minutos após a adição do tampão MCB.
4. O eluído contém etanol residual: Assegurar que o fluxo de lavagem é drenado do tubo de colheita e que a coluna é então centrifugada a > 12,000 x g durante 1 min.
B: Valor baixo de A260/A280
1. Água utilizada para diluir o ARN para a medição A260/A280: Utilizar 10 mm de Tris·Cl, pH 7.5, não água isenta de RNAse, para diluir a amostra antes de medir a pureza.
Fotos detalhadas
Certificações
Laboratório
Oficina
Área de produto de abrigo
Fornecedor Auditado 
