Descrição de Produto
EGFR humana 29 Kit de Detecção de mutação do gene (PCR em tempo real) Uso pretendido Este kit de teste é utilizada para a detecção qualitativa in vitro de mutações nos exons 18-21 do EGFR gene em amostras de humano não pequenas células em pacientes com câncer de pulmão (Consulte a Tabela 1 para obter mais detalhes) O câncer de pulmão se tornou a principal causa das mortes por cancro no mundo, ameaçam seriamente a saúde humana. Entre os pacientes com câncer de pulmão não pequenas células de pulmão representa cerca de 80%. EGFR está actualmente a mais importante alvo molecular para o tratamento de câncer de pulmão pequenas células. Fosforilação da EGFR podem promover o crescimento, a diferenciação de células tumorais, invasão, metástase, anti-apoptose e promover a angiogênese tumoral. EGFR inibidor de tirosina quinase (TKI) pode bloquear o EGFR via de transdução de sinal inibindo EGFR autophosphorylation, inibindo a proliferação e diferenciação de células tumorais, promovendo a apoptose de células tumorais, reduzindo a angiogênese tumoral, etc, de modo a conseguir a recuperação do tumor. A terapia orientada [1]. Um grande número de estudos mostraram que a eficácia terapêutica de EGFR-TKI está intimamente relacionado com o status de mutações do gene EGFR, e especificamente pode inibir o crescimento de células tumorais com EGFR mutações do gene [2 e 3]. O EGFR gene está localizado no braço curto do cromossomo 7 (7p12), com um comprimento total de 200 Kb, composto por 28 exons. A região de mutação é principalmente nos exons 18-21, entre os quais códons 746-753 no exon 19 Mutações em falta são responsáveis por cerca de 45% das mutações e a L858R mutação no exon 21 representa cerca de 40% a 45% [4]. O "NCCN orientações para o diagnóstico e tratamento do câncer de pulmão de células Non-Small" afirma claramente que o ensaio de mutação génica TFGE é necessária antes de EGFR-TKI medicação. Este kit de teste é usado para guiar a medicação do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR inibidor de tirosina quinase-TKI) drogas, e proporcionar uma base para a medicina personalizada para pacientes com câncer de pulmão pequenas células. Este kit é utilizado apenas para a detecção de mutações no gene EGFR em pacientes com câncer de pulmão pequenas células. Os resultados do teste são somente como referência para a prática clínica e não deve ser usado como a única base para tratamento individualizado dos pacientes. Os médicos devem combinar a condição do paciente, indicações de drogas, tratamento e fatores como reação e outros indicadores de teste de laboratório fazer um juízo global sobre os resultados do teste. Princípio de teste Este kit de detecção usa solução de enriquecimento de PCR, braços (amplificação refratária a tecnologia do sistema de mutação e sonda Taqman método combinado para detectar L858R, 19del, e outras mutações EGFR comum. Por enriquecer a mutação sites por PCR, resolução e sensibilidade de detecção são melhoradas. Sondas Taqman são marcadas com um repórter fluorophore FAM e um quencher fluorophore BHQ2. Quando a sonda está intacta, o sinal de fluorescência emitida pelo grupo do Activity Reporter é absorvida pelo grupo de têmpera; durante a amplificação da PCR, a 5'-3" a actividade de exonuclease de enzima Taq cliva e degrada a sonda, tornando o Reporter e o grupo fluorescente fluorophore têmpera é separado para que o sistema de monitoramento de fluorescência pode receber o sinal de fluorescência. A solução de enriquecimento de PCR reduz a seqüência de fundo do tipo selvagem através de digestão por enzimas de restrição e melhora ainda mais a resolução e sensibilidade de detecção. As características do método de armas: Taq DNA Polymerase, que não tem 3'-5' atividade exonuclease, pode reconhecer especificamente 3'final do escorvador manual. Apenas quando a 3'final do escorvador manual está completamente equivalenciado pode o fragmento em mutação local ser amplificado normalmente. Quando o 3'final do escorvador manual está diferente, ele não pode ser eficazmente amplificada. Por conseguinte, utilizando este método pode seletivamente amplificar a seqüência de mutantes e a sonda Taqman é combinado com o produto amplificado para identificar a seqüência alvo da mutação. A área de detecção selecionados pela solução de reacção de controle interno é um segmento relativamente conservador no exon 2 do gene EGFR humana, cerca de 120 bp, como o controle de qualidade dos reagentes, qualidade do DNA e a operação em si. Mesmo que o DNA é degradado, o controlo interno verdadeiramente capaz de reagir ao sistema. O montante efectivo de DNA do gene. O sistema de detecção contém uma certa proporção de dUTP, dNTP e uracilos glycosylase (enzima UDG DNA), essa enzima (também chamado de uracilos-N-glycosylase ou enzima UNG) pode interromper o PCR contendo dUTP Produto, impedindo assim a contaminação por PCR.
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